空氣中懸浮微生物的測(cè)定方法有空氣懸浮微生物法和沉降微生物法兩種，也即通常所說的浮游菌和沉降菌檢測(cè)法。浮游菌檢測(cè)法是利用采樣器收集懸浮在空氣中的微生物粒子于專門的培養(yǎng)基上；而沉降菌測(cè)試方法，是采用直徑為90mm的培養(yǎng)皿，在采樣點(diǎn)上利用自然沉降原理30min進(jìn)行采樣。把采樣后的基片經(jīng)過恒溫箱內(nèi)37℃、48h的培養(yǎng)生成菌落后進(jìn)行計(jì)數(shù)。使用的采樣器皿和培養(yǎng)液必須進(jìn)行消毒滅菌處理，采樣點(diǎn)可均勻布置或取代表性地點(diǎn)布置。浮游菌法采樣點(diǎn)數(shù)可與測(cè)定空氣潔凈度測(cè)點(diǎn)數(shù)相同。采樣時(shí)間應(yīng)根據(jù)空氣中微生物濃度來決定。沉降菌法的少培養(yǎng)皿數(shù)應(yīng)符合《通風(fēng)與空調(diào)工程施工質(zhì)量驗(yàn)收規(guī)范》GB 50243-2002的規(guī)定。
微生物檢測(cè)前，潔凈室必須處于正常運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)。其溫濕度、風(fēng)量、風(fēng)壓及風(fēng)速須控制在規(guī)定值內(nèi)；被測(cè)試的潔凈室已消過毒，測(cè)試人員不得超過2人，須穿潔凈工作服。采樣前，凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間：對(duì)于單向流潔凈室（ISO 5級(jí)）不得少于10min；對(duì)于非單向流潔凈室不得少于30min。工作區(qū)采樣點(diǎn)位置距地面0.8～1.5m，根據(jù)需要可在關(guān)鍵部位增加采樣點(diǎn)。
1、檢測(cè)方法
（1）沉降菌測(cè)試方法
1）把直徑90mm注入培養(yǎng)基的平皿放在測(cè)點(diǎn)處，開蓋暴露30min后，用手指輕推搭在培養(yǎng)皿邊上的皿蓋，將其蓋好，放入培養(yǎng)皿容器中。若培養(yǎng)皿放置密度較大，在蓋蓋時(shí)應(yīng)先蓋近處、后蓋遠(yuǎn)處的培養(yǎng)皿。以防蓋蓋操作造成對(duì)培養(yǎng)皿的污染。
2）把培養(yǎng)皿放入37℃的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48h，然后用肉眼計(jì)菌落數(shù)（CFU），再用放大鏡檢查是否有遺漏。
（2）浮游菌測(cè)試方法
1）對(duì)采樣器、培養(yǎng)皿進(jìn)行嚴(yán)格消毒，采樣口及采樣管在使用前須高溫滅菌。
2）測(cè)試人員應(yīng)穿潔凈工作服。
3）開動(dòng)真空泵抽氣，時(shí)間不少于5min，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，然后調(diào)好流量及轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。
4）關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿（雙手須用消毒劑消毒），蓋好蓋子后調(diào)節(jié)采樣器。
5）置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開啟采樣器、真空泵，根據(jù)采樣量選定采樣時(shí)間。
6）全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)48h，然后用肉眼計(jì)菌落數(shù)（CFU），再用放大鏡檢查是否有遺漏。
2、合格標(biāo)準(zhǔn)
計(jì)算被測(cè)潔凈室的浮游菌平均濃度
C=被測(cè)潔凈室總菌落數(shù)（CFU）/總采樣量（m³）
在生物潔凈室中，藥品、食品、生物制品的生產(chǎn)環(huán)境所要求的的浮游菌菌落數(shù)及潔凈度由相關(guān)規(guī)范給出，由C值來評(píng)定生物潔凈室是否達(dá)標(biāo)，若C值≤規(guī)定浮游菌菌落數(shù)，則達(dá)標(biāo)。
沉降菌的平均菌落數(shù)：M=M₁+M₂+…+Mⁿ/n
式中，M為被測(cè)潔凈室沉降菌平均菌落數(shù)（CFU/皿）
M_1、M_2、…Mⁿ為1號(hào)、2號(hào)、…、n號(hào)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)
n為培養(yǎng)皿總數(shù)。
若M≤規(guī)范或工藝要求的沉降菌菌落數(shù)，則被測(cè)潔凈室的微生物達(dá)到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。否則應(yīng)查找原因，進(jìn)行消毒滅菌，規(guī)范測(cè)試操作，重新測(cè)試。